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上海晶抗生物為您詳細講解血清凍存方法及注意事項
更新時間:2023-10-23   點擊次數:549次

血清保存注意事項:

(1) 血清需求長時刻保存的血清有必要儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超越1個月。因為血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留必定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。

(2) 熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已凍結的血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非有必要,一般不主張作此熱處理,因為熱處理會構成血清沉淀物明顯增多,并且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞縮短, 肥大細胞和血小板開釋組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化。

(3) 瓶裝血清凍結需選用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待悉數溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(當心勿構成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍結,這樣因溫度改變太大,簡單構成蛋白質凝集而呈現沉淀。

(4) 一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。

(5) 血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結后血清中纖維蛋白構成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量??捎秒x心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉淀物的構成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞成長,但如果置疑血清質量,則應立即停止使用,替換另一批號的血清。

(6) 血清 切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,一起血清中的有效成分會破會而影響血清質量。


血清凍存方法:

1. 將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但有必要注重的是,溶解進程中有必要規矩地搖晃均勻。

2. 血清凍住后發現有絮狀沉積物出現,該怎樣處置。 

3. 血清中沉積物的出現有許多緣由,遍及的緣由是因為血清中脂蛋白的變性構成的;而血纖維蛋白在血清凍住后,也會存在于血清中,亦是構成血清沉積物的首要緣由之一。但這些絮狀沉積物,并不影響血清自身的質量。若您欲去掉這些絮狀沉積物,可以將血清分裝至無菌離心管中,以400g略微離心,上清液即可接著參與培育基內一起過濾。不建議您以過濾的辦法去掉這些絮狀沉積物,因為它可能會堵塞您的過濾膜。


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